Introduction to ABO Discrepancies (10)
تفريغ المقطع
السلام عليكم ورحمه الله وبركاته، بسم الله والصلاة والسلام على رسول الله، أما بعد.
أستكمل مع حضراتكم إن شاء الله محاضرة Introduction to ABO Discrepancies. أخدنا المشاكل اللي هي بتظهر معانا في الـ Forward والمشاكل في الـ Reverse. طيب، وقلنا إن في بعض الحالات ممكن المشاكل دي تبان هنا وهنا مع بعض.
يعني Weak، زي ما قلنا Weak أو Missing Reaction هنا وهنا، أو Extra Reaction هنا وهنا. يعني تعالوا نشوف أي حالة كده إيه مع بعض، نفترض حالة مثلاً، آدي بصوا حضراتكم كده، آدي حالة Negative هنا وهنا، أو حالة بالشكل ده.
مثلاً، آه، شايفين حضراتكم الوضع عامل إزاي؟ Extra Reaction في الاتنين، في الـ Forward وفي الـ Reverse. وهنا Weak في الاتنين. أو نشوف الوضع هنا ولا هنا. والأسباب اللي احنا قلنا عليها في الـ Weak ممكن تبقى هنا وهنا، فتأثر على الـ Forward والـ Reverse.
أو إنه في Extra Reaction يبان هنا وهنا، زي ما قلنا مثلاً في حالات الـ Rouleaux، في حالات الـ Cold Autoantibody، وهكذا.
وزي ما قلنا إنه المخطط بتاع، أيوه اللي هو ده، لازم يكون في بالنا على طول واحنا شغالين، ومع التكرار والشغل هيثبت إن شاء الله.
تعالوا بقى مع بعض نراجع كل اللي قلناه ده. وهنا كده في شوية Flow Charts مفيدة جداً إن شاء الله هتوضح الأمور بالخطوات ماشية إزاي، وبرضه يكون قدام عينينا وفي بالنا على طول واحنا شغالين.
طب، في مشكلة؟ طب أول سؤال، أول حاجة: هل العينة عليها Label؟ والـ Label عليه البيانات؟ طيب، لو لأ، يبقى احنا العينة دي خلاص هنجنبها (نستبعدها) وعايزين عينة جديدة ونعيد الاختبار. طيب لأ، البيانات تمام، مافيش أي مشكلة.
طيب، هل في أي Clinical Errors؟ طيب، نظبط ونعيد الاختبار تاني. كان زمان شوية، في الناس اللي بتشتغل بالـ Tubes اللي هي إزاز، ممكن يكون جوه يتكسر شوية أنابيب، والإزاز الصغير ده حضرتك يدخل في الأنابيب اللي موجودة، حضرتك تيجي تاخد عينة، تاخد أنبوبة تشتغل بيها، ده ممكن يبوظ الشغل بتاعك. فهنا بيكون إيه، بيسأل: هل في أي Glass Fragments في الـ Testing Tubes؟ لو لقيت حاجة زي كده طبعاً استبعد الـ Tubes دي وعيد تاني.
هل العينة بأي سبب خارجي حصل لها Hemolysis؟ حاول تسحب عينة جديدة وتعيد الشغل. طيب، هل الـ Patient ده عنده أي مشاكل في الـ Clotting؟ عنده Fibrin (جلطات صغيرة) بيبان معانا في الـ Tube بتاعتنا؟ طب حاول تعيد العينة تاني، سواء وإن انت تحاول تسحب عينة وتكون عينة Plasma، أو باستخدام المواد اللي بنستخدمها مع الجلطات اللي بتحصل في الـ Tube دي.
هل الـ Reagent ده Contaminated؟ طيب، نستخدم Reagents تانية. الأجهزة بتاعتنا مش متظبطة؟ طب نظبط الأجهزة، نستخدم جهاز شغال تمام. الطريقة والشغل ماشي بخطوات مظبوطة؟ لو لأ، يبقى نعيد بالخطوات اللي المفروض مُتبعة واللي المفروض متحددة من المكان اللي احنا جايبين منه الـ Reagent.
طب عملنا أي حاجة من الحاجات دي، هل لو اتحلت، خلاص نكمل بقى على الإيه؟ الشغل بتاعنا اللي بعد كده. طب ما اتحلتش؟ نخش على الخطوات اللي بعد كده.
زي ما قلنا، طب هات بقى الـ History، تاريخ الحالة. شوف السن، شوف التشخيص، شوف تاريخ نقل الدم بتاعه. هي حالة Male ولا Female؟ ولو Female، الحمل فيه ولا لأ؟ أو أقرب حاجة كان امتى؟ شوف العلاجات بتاعته.
لو الـ Discrepancies دي بسبب حاجة زي ما قلنا خاصة بالشخص نفسه، هتكون إيه؟ Weak أو Missing Reaction في الـ Forward، Extra Reaction بـ Mixed Field، والناحية التانية Weak أو Missing في الـ Reverse أو Extra Reaction.
طيب، وكل حاجة من دول برضه ليها المخطط بتاعها.
عندنا لو Weak أو Missing Reaction في الـ Forward، قلنا إن هو ممكن يكون بسبب الـ Subgroups أو الـ Weak Expression ده بسبب حاجة مكتسبة زي حالات الـ Leukemia مثلاً. هنعمل إيه ساعتها؟ نعيد بقى الشغل بتاعنا مع Anti-A و Anti-B Reagent تانية. وفي ممكن Reagent ساعات بيستخدم طبعاً مش بشكل روتيني اسمه Anti-A,B، بتلاقوه على شكل Vial كده أو ممكن يكون موجود في بعض الكروت لبعض الشركات. طب والله اتحلت ولا لأ؟ طب لو ما اتحلتش، في بعض الحالات بيتعمل لها Adsorption و Elution بـ Anti-A أو Anti-B. وفي طبعاً حاجات أكتر من كده.
طيب، قلنا لو حالة عاملة زرع، نشوف برضه إيه التاريخ ونشوف الوضع إيه ونشوف هياخد ساعتها إيه. طيب، قلنا إنه ممكن الـ Reagent بتاعنا لو حصل له Neutralization بالـ Antigens الـ Free لو كتير. طب نعمل إيه ساعتها؟ حضرتك هات الـ Cells دي، مش هي الحاجات الـ Soluble دي حوالين الـ RBCs؟ طب ما تعمل Washing كويس للعينة وعيد تاني، صح كده؟
طيب، ده بالنسبة للـ Weak أو الـ Missing Reaction في الـ Forward.
طيب، الـ Extra Reaction قلنا أسباب زي الـ Rouleaux، تفتكروا اللي هو كان شكل Stack of Coins (العملات اللي فوق بعض دول). وبنغسل الـ Cells ونعيد. الـ Wharton's Jelly، جاية من إيه؟ اللي هي الـ Cord Sample حصل لها Contamination بالـ Wharton's Jelly. وفيها بنغسل كتير كتير كتير ونعيد الاختبار تاني. طب اتحلت؟ تمام. طب ما اتحلتش؟ هات عينة بقى تانية من الجسم ونعيد الاختبار تاني.
طيب، لو حالة Acquired B؟ طيب، احنا ممكن نعيد الاختبار تاني مع Reagents تانية، ونعمل Typing للـ Cells بتاعة المريض عشان نتأكد برضه، اللي هو إن هو A1، نعيده مع الـ Anti-A1، ونعمل Auto Control. نشوف الـ History بتاعه، تمام؟
طيب، لو عنده Autoantibody، اللي هو Cold Autoantibody. بنعمل Pre-warm، ونستخدم عينة EDTA، وبنحاول إن هي تكون في 37 درجة مئوية. وفي بعض بقى الحاجات يعني المتقدمة شوية أو في أماكن أعلى شوية، ممكن بنستخدم بعض مواد للحاجات الـ Cold دي زي حاجة اسمها DTT (Dithiothreitol) أو 2-ME (2-Mercaptoethanol). دي بتستخدم في الحاجات الـ Cold اللي بتدخل معانا في العينات أو في الفصايل مثلاً.
الـ A(B) phenotype والـ B(A) phenotype، زي ما قلنا، نشتغل مع Reagents تانية ونعيد. الـ Polyagglutination، قلنا الـ Antigen الإيه؟ المخفي. أما نيجي ساعتها بقى نستخدم حاجة اسمها إيه؟ أو Reagent يكون مصدرها مش بشري (Non-human Antisera) أو بيستخدموا ممكن حاجات تانية زي Serum معين لوقت معين أو من الـ Cord Serum ونعيد تاني. هو ليه الحاجات دي؟ لإن الحاجات دي اللي غالباً ما بيكونش فيها الـ Antibodies اللي بتتفاعل مع الـ Antigens المخفية. ولحضراتكم كده، الـ Antigens دي اسمها إيه؟ Cryptantigens. إن هي أكنها مخفية كده. فاحنا بنشوف إيه الحاجات اللي ما بيكونش فيها Antibodies ضد الـ Antigens دي ونعمل معاها التفاعل. تمام كده؟
طيب، دي كده أسباب أو أشهر أسباب الـ Extra Reaction.
وعندنا بعد كده الإيه؟ الـ Mixed Field. اللي قلنا عليه، اللي بيسموه ساعات اللي هو الـ Mixed Cell Population. تمام؟ ونشوف بقى هو، زي ما قلنا، إيه اللي سببه؟ نقل دم حديث (هو مثلاً A وواخد O)، أو زرع، أو إن هو Subgroup زي ما قلنا.
طيب، ده كده بالنسبة للإيه؟ للـ Forward.
بالنسبة للـ Reverse. أول حاجة إن هو يكون Weak أو Missing. ممكن يكون بسبب الـ Prozone. وساعتها يعني ممكن نخفف الـ Serum شوية ونعيد تاني. طبعاً ده بيكون في الفصيلة فقط، في الجزء ده، عند الحالة دي بس. ممكن يكون بسبب السن أو الحالة المناعية مثلاً زي ما قلنا، أو العلاجات اللي بتتاخد للحالة. نشوف السن والـ History والتشخيص. بيتعمل بقى Incubation للـ Reverse اللي احنا بنشتغله ده في الـ Room Temperature ونعيد تاني. طيب، وفي بنشتغل بعد كده في 18 درجة ونعيد تاني، وممكن 4 درجات على طول. وفي بنشتغل إيه؟ بيروح على 4 درجات بعد الـ Room Temperature على طول.
ومن ضمن الحاجات اللي قلنا عليها اللي هو الإيه؟ اللي هو الـ Steric Hindrance. بيحصل ارتباط للـ Proteins اللي بنسميها الـ Complement، ترتبط بالـ Antibodies بعد الـ Antibodies دي ما ترتبط بالإيه؟ بالـ Antigen على الكرات. وبالتالي الكرات دي مش هترتبط بالكرات دي نتيجة الحاجز اللي حصل. وعشان حاجة زي كده، يبقى احنا غالباً أغلب شغلنا يفضل يكون بعينة EDTA عشان المشاكل اللي زي دي. تمام؟
ده كده الـ Weak أو الـ Missing Reaction اللي بتحصل فين؟ في الـ Reverse.
طيب، الـ Extra Reaction. عندنا قلنا، يعني بلاش دي دلوقتي. عندنا لو حالة Subgroup مثلاً وعنده Anti-A1. نفعل الـ Cells بتاعة العينة عشان نتأكد مع الـ Anti-A1. ولو عندنا Cells اللي هي لـ Subgroup A2، ممكن نفعل الـ Plasma بتاعتها معاها. تمام؟
طيب، عندنا Cold Alloantibody. زي ما قلنا، ممكن يكون الشخص عنده Antibody ضد Antigen موجود على الـ RBCs اللي احنا بنستخدمها في الـ Reverse. ممكن يتعمل ساعتها Identification، نعرف إيه الـ Antibody ده. ممكن نعيد الـ Reverse مع RBCs مش عليها الـ Antigen ده.
طيب، عندنا Cold Autoantibody. بيتعمل بقى إيه؟ ممكن يتعمل DAT (Direct Antiglobulin Test) ويتعمل Pre-warm. وممكن في بعض الأحوال يتعمل Adsorption أو Cold Adsorption. تمام؟
الـ Passively Acquired Antibody. نشوف بقى إيه؟ إيه اللي هو نقله؟ إيه اللي حصل بالظبط؟ وحالات الـ Rouleaux. وبنستخدم فيها حاجة اسمها إيه؟ الـ Saline Replacement. زي ما أخدناه في مقطع عملي بنك الدم اللي هو المستوى المتوسط في المقاطع بتاعة الـ ABO Discrepancies. تمام كده؟
طيب، يا ريت نقراها أكتر من مرة الـ Flow Charts دي مع المخطط بتاع الـ Discrepancies اللي هو ده. نبقى عارفين التقسيمة بتاعتنا: Forward, Reverse. الـ Forward كذا وكذا وكذا. الـ Reverse كذا وكذا. وكل حاجة منهم أشهر الأسباب. تمام كده؟
طيب، دي كده بشكل عام أشهر الحاجات اللي ممكن تطلع معانا والمشاكل اللي بتطلع معانا في الفصيلة وبتسبب لنا الـ ABO Discrepancies. وزي ما قلنا في البداية خالص، هنقولها باختصار شديد بحيث إن هي بس تكون كمقدمة نبني عليها في أي وقت.
ويا رب كده يكون الكلام وصل لحضراتكم بشكل ميسر ويكون قدرت كده إيه إن أنا أقول الحاجات اللي ممكن تبان مع حضراتكم وممكن ما يكونش ليها أي تفسير أو مش واضحة.
طيب، بكده تكون المحاضرة دي انتهت. كان معكم أخوكم شريف عبد المنعم. إلى أن نلتقي إن شاء الله في المقطع اللي جاي. سبحانك اللهم وبحمدك، أشهد أن لا إله إلا أنت، أستغفرك وأتوب إليك. والسلام عليكم ورحمه الله وبركاته.
ادرس تفريغ المقطع مع مدرس
شرح محاضرة: مقدمة في تناقضات فصائل الدم (ABO Discrepancies)
السلام عليكم ورحمة الله وبركاته، أهلاً بكم يا دكاترة ويا متخصصين المستقبل. النهاردة هنكمل كلامنا عن موضوع مهم جداً في بنك الدم وهو الـ ABO Discrepancies، يعني إيه؟ يعني لما نتيجة فصيلة الدم تطلع مش منطقية أو فيها تناقض بين الـ Forward Grouping والـ Reverse Grouping. خلينا نبسط الأمور ونفهمها خطوة بخطوة.
1. المشاكل ممكن تظهر فين؟ (Recap)
زي ما اتفقنا المرة اللي فاتت، المشاكل دي ممكن نشوفها في:
- الـ Forward Grouping (لما بنختبر كرات الدم الحمراء بتاعة المريض).
- الـ Reverse Grouping (لما بنختبر البلازما أو السيرم بتاع المريض).
- أو ممكن المشكلة تظهر في الاتنين مع بعض!
إزاي يعني في الاتنين؟ ممكن نلاقي:
- تفاعل ضعيف أو مفقود (Weak or Missing Reaction) في الـ Forward والـ Reverse.
- أو تفاعل زيادة غير متوقع (Extra Reaction) في الـ Forward والـ Reverse برضه.
زي مثلاً في حالات الـ Rouleaux (كرات الدم الحمراء عاملة زي عواميد الجنيهات الفضة) أو وجود Cold Autoantibody (جسم مضاد ذاتي بيشتغل في البرد)، دي ممكن تعمل تفاعلات زيادة في الناحيتين.
مهم جداً: المخطط أو الـ Flow Chart اللي بيوضح خطوات التعامل مع الـ Discrepancies لازم يكون دايماً في دماغنا واحنا شغالين. مع الشغل والتكرار هتلاقوه ثبت معاكم إن شاء الله.
سؤال للتفكير: لو لقيت نتيجة الـ Forward بتقول إن الفصيلة A، ونتيجة الـ Reverse بتقول إنها O، هل ده يعتبر Discrepancy؟ وليه؟
خلاصة الجزء ده: الـ ABO Discrepancy هو عدم تطابق بين نتيجة الـ Forward والـ Reverse grouping. ممكن المشكلة تكون ضعف/غياب تفاعل أو تفاعل زيادة، وممكن تظهر في ناحية واحدة أو في الناحيتين. فهم طبيعة المشكلة هو أول خطوة للحل.
2. خطوات حل المشكلة: المنهج العلمي (Troubleshooting Flowchart)
لما نلاقي مشكلة أو Discrepancy، مش بنخش على الأسباب المعقدة على طول. لأ، فيه خطوات أولية بسيطة لازم نتأكد منها الأول، زي ما الـ Flow Charts بتوضح:
- العينة والبيانات (Sample Labeling): هل العينة عليها Label صح؟ وهل البيانات كاملة ومطابقة؟ لو لأ، يبقى العينة دي مينفعش نشتغلها ولازم نجيب عينة جديدة.
- الأخطاء الإجرائية (Clinical Errors): هل فيه أي خطأ حصل أثناء سحب العينة أو التعامل معاها قبل ما توصل المعمل؟ لو فيه شك، نصلح الخطأ ونطلب عينة جديدة لو لازم.
- مشاكل فنية بسيطة:
- هل فيه كسر إزاز صغير في الأنابيب (Glass Fragments)؟ (ده كان بيحصل زمان مع الأنابيب الإزاز). لو آه، استبعد الأنابيب دي.
- هل العينة فيها تكسير (Hemolysis) لأي سبب؟ لو آه، نحاول نجيب عينة تانية متكسرتش.
- هل فيه جلطات صغيرة (Fibrin Clots) في الأنبوبة؟ دي ممكن تتداخل مع التفاعل. ممكن نحاول نستخدم عينة Plasma (مسحوبة على مانع تجلط مناسب زي EDTA) أو نستخدم مواد معينة للتعامل مع الجلطات دي.
- الكواشف والأجهزة (Reagents & Equipment):
- هل الـ Reagent ممكن يكون بايظ أو ملوث (Contaminated)؟ نجرب نستخدم Reagent تاني سليم.
- هل الأجهزة (زي السنترفيوج مثلاً) مش متظبطة؟ نتأكد من معايرة وظبط الأجهزة.
- الطريقة (Procedure): هل ماشيين على الخطوات صح زي ما الشركة المصنعة للـ Reagent بتقول؟ لو لأ، نعيد الشغل بالطريقة المظبوطة.
لو عملنا الحاجات دي والمشكلة اتحلت، يبقى كان سببها حاجة بسيطة من دول وخلاص نكمل شغلنا. طب لو لسه المشكلة موجودة؟ يبقى نخش على الخطوات اللي بعد كده.
سؤال للتفكير: ليه مهم جداً نتأكد من بيانات العينة (Labeling) كأول خطوة؟ إيه أخطر حاجة ممكن تحصل لو فيه خطأ في بيانات العينة؟
خلاصة الجزء ده: قبل ما ندور على أسباب معقدة للـ Discrepancy، لازم نتأكد الأول من سلامة العينة، البيانات، الكواشف، الأجهزة، والطريقة اللي اشتغلنا بيها. كتير من المشاكل بتتحل في الخطوات الأولية دي.
3. مفتاح الحل: تاريخ الحالة (Patient History)
لو المشكلة لسه موجودة بعد الخطوات الأولية، يبقى لازم نبص على تاريخ الحالة كويس جداً. المعلومات دي ممكن تفسر حاجات كتير:
- السن (Age): الأطفال الصغيرين أوي (أقل من 4-6 شهور) ممكن ميكونوش لسه كونوا الأجسام المضادة بتاعة الـ Reverse Grouping. كبار السن أوي ممكن تكون الأجسام المضادة عندهم ضعيفة.
- التشخيص (Diagnosis): بعض الأمراض زي الـ Leukemia (سرطان الدم) ممكن تضعف الـ Antigens على كرات الدم. بعض أنواع السرطانات التانية ممكن تسبب تغيرات زي الـ Acquired B.
- تاريخ نقل الدم (Transfusion History): لو المريض ناقل دم قريب بفصيلة مختلفة (مثلاً هو A ونقل O)، ده هيعمل Mixed Field Reaction.
- النوع والحمل (Sex & Pregnancy): لو الحالة ست وحامل أو كانت حامل قريب، ده ممكن يأثر على الأجسام المضادة.
- العلاجات (Medications): بعض الأدوية ممكن تأثر على جهاز المناعة أو تسبب تفاعلات غير متوقعة.
- زراعة الأعضاء أو نخاع العظم (Transplant): ده بيغير فصيلة الدم تماماً أو بيعمل خليط من الفصايل لفترة.
سؤال للتفكير: ليه معرفة إن المريض عامل زراعة نخاع عظم (Bone Marrow Transplant) مهمة جداً في تفسير نتيجة الفصيلة؟
خلاصة الجزء ده: تاريخ الحالة المرضي ونقل الدم والعلاجات والسن معلومات حيوية جداً ممكن تفسر سبب الـ Discrepancy اللي مش لاقيين له سبب فني واضح.
4. الغوص أعمق: مشاكل الـ Forward Grouping بالتفصيل
طيب، لو المشكلة في الـ Forward Grouping تحديداً، إيه ممكن تكون الأسباب وإزاي نتعامل معاها؟
أ. تفاعل ضعيف أو مفقود (Weak or Missing Reaction)
- السبب: ممكن يكون المريض عنده Subgroup من فصيلة A أو B (يعني A أو B ضعاف، زي A2 مثلاً). أو ممكن يكون ضعف مكتسب (Acquired Weakness) زي في حالات الـ Leukemia.
- الحل: نعيد الشغل بـ Anti-A و Anti-B من شركة تانية أو Lot number مختلف. ممكن نستخدم Anti-A,B Reagent (ده بيتفاعل مع A و B حتى لو ضعاف). في حالات معقدة ممكن نعمل Adsorption و Elution (دي تكنيكات متقدمة شوية لفصل وتحديد الأجسام المضادة). ممكن نزود فترة الـ Incubation أو نحضن في درجة حرارة الغرفة أو أقل شوية.
- السبب: ممكن يكون فيه Soluble Antigens كتير في البلازما (Antigens دايبة) عملت Neutralization للـ Reagent قبل ما يوصل لكرات الدم.
- الحل: نغسل كرات الدم كويس جداً (Washing) كذا مرة بمحلول ملح (Saline) عشان نشيل أي حاجة دايبة حواليها، وبعدين نعيد الاختبار.
- السبب: حالة زراعة نخاع (Transplant).
- الحل: نعرف تاريخ الحالة ونوع الزراعة وندي الدم المناسب حسب البروتوكول المتبع.
ب. تفاعل زيادة (Extra Reaction)
- السبب: Rouleaux (كرات الدم لازقة في بعض زي الأبراج). ده بيحصل بسبب زيادة بروتينات معينة في البلازما.
- الحل: نغسل الـ Cells كويس ونعيد الاختبار. أو نعمل تكنيك اسمه Saline Replacement (بنشيل البلازما ونحط مكانها Saline).
- السبب: تلوث العينة (خاصة عينة الحبل السري Cord Sample) بمادة الـ Wharton's Jelly. المادة دي لزجة وممكن تخلي الكرات تلزق في بعض.
- الحل: نغسل الـ Cells كويس جداً جداً (ممكن 6-8 مرات) ونعيد الاختبار. لو منفعش، ناخد عينة دم من وريد الطفل نفسه لو أمكن.
- السبب: Acquired B Antigen. دي حالة بتحصل لبعض مرضى فصيلة A (خصوصاً A1) اللي عندهم عدوى بكتيرية معينة (غالباً في القولون) أو سرطان في القولون. البكتيريا دي بتطلع إنزيمات بتغير شكل الـ A Antigen شوية فبيبقى شبه الـ B Antigen، فيدّي تفاعل ضعيف مع الـ Anti-B.
- الحل: نراجع تاريخ الحالة (هل فيه عدوى؟). نعيد الاختبار بـ Anti-B Reagent من نوع تاني. نتأكد إن الشخص فعلاً A1 (نعمل اختبار بـ Anti-A1 Lectin). نعمل Auto Control (نختبر كرات المريض مع السيرم بتاعه) عشان نتأكد إن مفيش Autoantibody. ممكن نعالج السيرم بحمض خفيف ونعيد الـ Reverse grouping (هيكسر الـ Acquired B).
- السبب: وجود Cold Autoantibody (جسم مضاد ذاتي بيشتغل في درجة حرارة الغرفة أو أبرد و يلزق في كرات الدم كلها).
- الحل: نشتغل بطريقة الـ Pre-warm Technique (نسخن الكواشف والعينة و الـ Saline لـ 37°م ونحافظ على الدفء ده طول الشغل). نستخدم عينة مسحوبة على EDTA. ممكن نستخدم مواد زي DTT (Dithiothreitol) أو 2-ME (2-Mercaptoethanol) في حالات معينة (دي بتكسر الأجسام المضادة نوع IgM اللي غالباً بتكون Cold).
- السبب: Phenotypes نادرة زي A(B) phenotype أو B(A) phenotype.
- الحل: نعيد الشغل بـ Reagents تانية ونقارن النتائج.
- السبب: Polyagglutination. دي حالة نادرة كرات الدم الحمراء فيها بيظهر عليها Antigens كانت مستخبية (اسمها Cryptantigens) نتيجة عدوى معينة مثلاً. الـ Antigens دي بتتفاعل مع أجسام مضادة موجودة بشكل طبيعي في معظم الـ Reagents اللي جاية من البلازما البشرية.
- الحل: نستخدم Reagents يكون مصدرها غير بشري (Non-human source) أو نستخدم أنواع معينة من الـ Sera أو Lectins اللي معروف إنها مفهاش الأجسام المضادة دي.
ج. تفاعل خليط (Mixed Field Reaction)
- السبب: وجود نوعين من كرات الدم الحمراء في العينة (Mixed Cell Population). أشهر أسبابه:
- نقل دم حديث (Recent Transfusion) بفصيلة مختلفة (مثلاً A ونقل O).
- زراعة نخاع عظم (Bone Marrow Transplant).
- بعض الـ Subgroups زي A3 ممكن تدي شكل الـ Mixed Field.
- حالات الـ Chimera (نادرة جداً).
- الحل: نراجع تاريخ الحالة كويس جداً (نقل دم؟ زراعة؟). شكل التفاعل نفسه بيكون مميز (جزء متجلط وجزء لأ).
سؤال للتفكير: ليه غسيل كرات الدم (Washing) مهم جداً في حل مشاكل زي الـ Rouleaux والـ Wharton's Jelly؟ إيه اللي بيتشال بالغسيل؟
خلاصة الجزء ده: مشاكل الـ Forward بتنقسم لضعف/غياب تفاعل (أسبابها Subgroups، أمراض، Neutralization)، أو تفاعل زيادة (أسبابها Rouleaux، Wharton's Jelly، Acquired B، Cold Autoantibodies، Polyagglutination)، أو تفاعل خليط (Mixed Field) بسبب وجود نوعين من الخلايا. لكل مشكلة طرق حلها الخاصة، وغالباً بتعتمد على الغسيل، استخدام كواشف مختلفة، التدفئة، أو مراجعة تاريخ الحالة.
5. الغوص أعمق: مشاكل الـ Reverse Grouping بالتفصيل
طيب، لو المشكلة في الـ Reverse Grouping (اختبار البلازما/السيرم)، إيه ممكن تكون الأسباب وإزاي نتعامل معاها؟
أ. تفاعل ضعيف أو مفقود (Weak or Missing Reaction)
- السبب: السن (Age) - الأطفال الصغيرين أوي (أقل من 4-6 شهور) لسه مكوّنوش الأجسام المضادة Anti-A و Anti-B بكمية كافية. كبار السن ممكن تكون الأجسام المضادة عندهم ضعفت.
- السبب: حالة مناعية ضعيفة (Immunocompromised) بسبب أمراض معينة (زي بعض أنواع الـ Leukemia أو الـ Lymphoma) أو بسبب أدوية مثبطة للمناعة (Immunosuppressive drugs).
- السبب: حالة نادرة اسمها Hypogammaglobulinemia (نقص حاد في الأجسام المضادة).
- السبب: Prozone Phenomenon. ده بيحصل لما يكون تركيز الأجسام المضادة عالي أوي، فبيمنع التفاعل بدل ما يعمله! (بيحصل أكتر في اختبارات تانية غير الفصايل بس ممكن يحصل).
- الحل لكل دول (ما عدا البروزون): نراجع السن وتاريخ الحالة المرضي والعلاجي. نزود كمية السيرم أو البلازما المستخدمة (مثلاً 4 نقط بدل 2). نعمل Incubation للـ Reverse Tubes في درجة حرارة الغرفة (Room Temperature) لمدة 15-30 دقيقة. لو لسه مفيش تفاعل، ممكن نحضن في درجة حرارة 18°م أو حتى 4°م (عشان نقوي الـ Antibodies اللي ممكن تكون Cold IgM) ونرجع ندور الأنابيب ونشوف النتيجة. لازم نتأكد إن الـ Reagent Cells (A1 cells و B cells) حالتهم كويسة.
- الحل للـ Prozone: نخفف السيرم بتاع المريض (مثلاً 1:10 أو أكتر) بمحلول ملح ونعيد الاختبار.
- السبب: Steric Hindrance بسبب الـ Complement. أحياناً الـ Antibody (IgM) يرتبط بالـ Antigen على الـ Reagent Cell، ويقوم الـ Complement يرتبط بالـ Antibody ده، فالـ Complement الكبير ده يعمل حاجز يمنع كرات الدم دي إنها ترتبط ببعض وتعمل Agglutination.
- الحل: استخدام عينة Plasma مسحوبة على EDTA بيمنع تفعيل الـ Complement وبالتالي يقلل المشكلة دي.
ب. تفاعل زيادة (Extra Reaction)
- السبب: وجود Anti-A1 في شخص فصيلته A2 أو A2B. دول بيكون عندهم Anti-B طبيعي (لو A2) أو مفيش (لو A2B)، بس ممكن يكون عندهم Anti-A1 اللي هيتفاعل مع الـ A1 cells المستخدمة في الـ Reverse.
- الحل: نعمل اختبار لكرات دم المريض مع Anti-A1 Lectin عشان نتأكد إنه A2. ممكن نعمل Reverse تاني باستخدام خلايا A2 cells (لو متاحة) بدل A1 cells، المفروض التفاعل يختفي.
- السبب: وجود Cold Alloantibody. يعني جسم مضاد عند المريض ضد Antigen موجود على الـ Reagent Cells (A1 أو B cells) غير الـ A أو الـ B، وبيشتغل في درجة حرارة الغرفة. زي مثلاً Anti-M, Anti-N, Anti-P1, Anti-Lea, Anti-Leb.
- الحل: نعمل Antibody Identification Panel عشان نعرف إيه هو الـ Antibody ده. ممكن نعيد الـ Reverse باستخدام Reagent Cells تكون سالبة للـ Antigen اللي الجسم المضاد ده ضده (لو عرفناه وقدرنا نجيب الخلايا دي). أو ممكن نعمل الـ Reverse بتقنية الـ Pre-warm لو الجسم المضاد ده بيشتغل بس في البرد.
- السبب: وجود Cold Autoantibody. زي ما بيعمل مشكلة في الـ Forward، ممكن يعمل مشكلة في الـ Reverse برضه ويتفاعل مع كل الـ Reagent Cells (وأحياناً مع خلايا الـ O المستخدمة في الـ Screening).
- الحل: نعمل Auto Control (هيكون موجب). نعمل DAT (Direct Antiglobulin Test) (ممكن يكون موجب). نستخدم تقنية الـ Pre-warm للـ Reverse. في حالات قوية، ممكن نعمل Cold Adsorption (بنسيب السيرم يتشبع بخلايا المريض نفسه في التلاجة عشان الـ Autoantibody يلزق فيها ونتخلص منه ونستخدم السيرم النضيف ده في الـ Reverse).
- السبب: أجسام مضادة مكتسبة بشكل سلبي (Passively Acquired Antibody). مثلاً واحد فصيلته B واخد Plasma أو Platelets من متبرع فصيلته A (فيها Anti-B)، فالـ Anti-B اللي خده ده هيبان في الـ Reverse بتاعه.
- الحل: نراجع تاريخ نقل الدم والمكونات المنقولة كويس جداً.
- السبب: Rouleaux. زي ما بيعمل Extra Reaction في الـ Forward، ممكن يعملها في الـ Reverse برضه ويخلي كل الأنابيب شكلها موجب كاذب.
- الحل: نعمل تكنيك الـ Saline Replacement. بعد ما نعمل سنترة للأنابيب ونلاقي كله موجب، نشيل السيرم بالراحة ونحط مكانه نقطتين Saline ونعمل Mix خفيف ونرجع نعمل سنترة تاني. لو كان Rouleaux، التفاعل هيروح، لو كان Agglutination حقيقي، هيفضل موجود.
سؤال للتفكير: لو طفل عمره شهرين طلعت نتيجته O في الـ Forward ومفيش أي تفاعل في الـ Reverse، هل دي Discrepancy ولا نتيجة متوقعة؟ وليه؟
خلاصة الجزء ده: مشاكل الـ Reverse بتنقسم لضعف/غياب تفاعل (أسبابها السن، ضعف المناعة، Prozone، Steric Hindrance)، أو تفاعل زيادة (أسبابها Anti-A1، Cold Alloantibodies، Cold Autoantibodies، Passively Acquired Antibodies، Rouleaux). الحلول بتشمل التحضين في درجات حرارة مختلفة، استخدام EDTA، تخفيف السيرم، معرفة نوع الـ Antibody، أو تكنيك الـ Saline Replacement.
6. التطبيق العملي والخلاصة النهائية
نصيحة مهمة: اقروا الـ Flow Charts دي كويس أكتر من مرة، وخلوها جنبكم مع المخطط العام بتاع الـ Discrepancies اللي بيقسم المشاكل لـ Forward و Reverse، وكل واحد فيهم Weak/Missing أو Extra أو Mixed Field، وأشهر أسباب كل حاجة. مع الوقت والممارسة، هتقدروا تتعاملوا مع أي نتيجة مش مظبوطة وتوصلوا للسبب الصح.
الأهمية في العالم الحقيقي (Real-World Application)
ليه كل الكلام ده مهم؟ لأن تحديد فصيلة الدم بشكل صحيح 100% هو حجر الزاوية في نقل دم آمن (Safe Blood Transfusion). أي خطأ في تحديد الفصيلة ممكن يؤدي لمضاعفات خطيرة جداً للمريض، قد تصل للوفاة لا قدر الله. فهم الـ ABO Discrepancies وكيفية حلها بيضمن إننا ندي للمريض الدم المناسب ليه تماماً ونحافظ على سلامته. ده شغلنا الأساسي كمتخصصين في بنك الدم.
كده نكون غطينا بشكل عام أشهر المشاكل اللي ممكن تقابلنا وتعمل ABO Discrepancies. الهدف كان تبسيط الموضوع وتقديم مقدمة نقدر نبني عليها بعد كده.
أتمنى يكون الشرح وصل لحضراتكم بشكل سهل ومبسط وقدرت أوضح النقط اللي ممكن تكون غامضة شوية.
كان معكم أخوكم شريف عبد المنعم. سبحانك اللهم وبحمدك، أشهد أن لا إله إلا أنت، أستغفرك وأتوب إليك. والسلام عليكم ورحمه الله وبركاته.
تفريغ المقطع في صورة نقاط
مراجعة وتنسيق محتوى محاضرة "Introduction to ABO Discrepancies"
مقدمة واستكمال محاضرة ABO Discrepancies
- الهدف: استكمال شرح محاضرة مقدمة عن عدم تطابق فصائل الدم (ABO Discrepancies).
- ملخص ما سبق: تم تناول المشاكل اللي بتظهر في:
- اختبار الفصيلة الأمامي (Forward Grouping).
- اختبار الفصيلة العكسي (Reverse Grouping).
- نقطة إضافية: التأكيد على إن فيه حالات ممكن المشاكل تظهر في الـ Forward و الـ Reverse مع بعض في نفس الوقت.
- أمثلة:
- تفاعلات ضعيفة أو مفقودة (Weak or Missing Reaction) هنا وهنا.
- مثال: نتيجة Negative في اختبارات الـ Anti-A و Anti-B و كمان مفيش تفاعل في الـ Reverse.
- تفاعلات إضافية (Extra Reaction) هنا وهنا.
- مثال: وجود تفاعل إضافي في الـ Forward مع Anti-A أو Anti-B، و كمان تفاعل إضافي في الـ Reverse.
- تفاعلات ضعيفة أو مفقودة (Weak or Missing Reaction) هنا وهنا.
- الأسباب المشتركة: نفس الأسباب اللي بتعمل تفاعل ضعيف (Weak Reaction) أو تفاعل إضافي (Extra Reaction) في جزء واحد ممكن تأثر على الجزئين.
- أمثلة لأسباب Extra Reaction في الناحيتين:
- ظاهرة Rouleaux (تلاصق كرات الدم الحمراء بشكل يشبه رصة العملات المعدنية).
- وجود Cold Autoantibody (جسم مضاد ذاتي يتفاعل في درجات الحرارة المنخفضة).
- أمثلة لأسباب Extra Reaction في الناحيتين:
- أمثلة:
- أهمية المخطط (Flowchart):
- التأكيد على ضرورة استحضار المخطط الخاص بتحليل وتفسير الـ Discrepancies بشكل دائم أثناء العمل.
- مع التكرار والممارسة، المخطط ده هيثبت في الذهن وهيسهل الشغل.
خطوات حل مشاكل الـ ABO Discrepancies (Flowchart)
- الخطوة الأولى: التحقق المبدئي (Pre-analytical Checks)
- السؤال الأول: هل العينة عليها Label والبيانات كاملة وصحيحة؟
- لو لأ: العينة دي يتم استبعادها (reject) فوراً. لازم نطلب عينة جديدة ونعيد الاختبار من الأول.
- لو آه (البيانات تمام): ننتقل للخطوة التالية.
- السؤال الثاني: هل فيه أي أخطاء إكلينيكية أو فنية واضحة (Clinical/Technical Errors)؟
- لو آه: نحاول نصلح الخطأ ده (مثلاً خطأ في إضافة الريأجينت، كميات غير صحيحة) ونعيد الاختبار تاني.
- لو لأ: ننتقل للخطوات التالية للتحقق من مشاكل تانية محتملة.
- السؤال الأول: هل العينة عليها Label والبيانات كاملة وصحيحة؟
- الخطوة الثانية: التحقق من مشاكل فنية محددة (Specific Technical Issues)
- Glass Fragments (شظايا زجاج) في أنابيب الاختبار؟ (خاصةً مع استخدام الأنابيب الزجاجية قديماً)
- لو آه: الشظايا دي ممكن تبوظ النتيجة. لازم نستبعد الأنابيب دي ونستخدم أنابيب سليمة ونعيد الاختبار.
- لو لأ: نكمل.
- Hemolysis (تكسر كرات الدم الحمراء) في العينة بسبب خارجي؟ (مثل صعوبة السحب، نقل عنيف للعينة)
- لو آه: التكسر ممكن يأثر على التفاعل. يفضل نسحب عينة جديدة ونعيد الشغل.
- لو لأ: نكمل.
- مشاكل في التجلط (Clotting Issues) أو وجود Fibrin (جلطات صغيرة) في الأنبوبة؟
- لو آه: الفايبرين ممكن يسبب تجمعات false positive.
- الحل: نحاول نعيد سحب العينة ونفصلها للحصول على Plasma (لأن فيها مضاد للتجلط)، أو نستخدم مواد معينة للتعامل مع الجلطات الصغيرة في الأنبوبة لو بنستخدم Serum.
- لو لأ: نكمل.
- لو آه: الفايبرين ممكن يسبب تجمعات false positive.
- Contaminated Reagent (ريأجينت ملوث أو تالف)؟
- لو آه: نستخدم Reagents تانية من عبوة جديدة أو lot number مختلف.
- لو لأ: نكمل.
- الأجهزة غير مضبوطة (Equipment Calibration)؟ (مثلاً جهاز الطرد المركزي سرعته أو وقته غلط)
- لو آه: نظبط الأجهزة أو نستخدم جهاز تاني شغال ومتظبط.
- لو لأ: نكمل.
- الطريقة أو الخطوات المتبعة في الشغل (Procedure) مش مظبوطة؟
- لو آه: لازم نراجع ونتبع الخطوات القياسية الموصى بها من الشركة المصنعة للـ Reagent.
- لو لأ: نكمل.
- Glass Fragments (شظايا زجاج) في أنابيب الاختبار؟ (خاصةً مع استخدام الأنابيب الزجاجية قديماً)
- الخطوة الثالثة: تقييم الحل
- السؤال: هل أي خطوة من الخطوات السابقة حلت المشكلة (الـ Discrepancy)؟
- لو آه (المشكلة اتحلت): خلاص، نكمل شغلنا ونعتمد النتيجة.
- لو لأ (المشكلة لسه موجودة): يبقى غالباً المشكلة متعلقة بالمريض نفسه أو بعينته، وننتقل للخطوات المتقدمة.
- السؤال: هل أي خطوة من الخطوات السابقة حلت المشكلة (الـ Discrepancy)؟
الخطوات المتقدمة: التحقق من أسباب متعلقة بالمريض (Patient-Specific Causes)
- الخطوة الأولى: جمع معلومات عن الحالة (Patient History)
- الأهمية: خطوة ضرورية جداً لما تكون المشكلة مش فنية.
- المعلومات المطلوبة:
- السن: (حديثي الولادة وكبار السن ممكن يكون عندهم Reverse group ضعيف).
- التشخيص (Diagnosis): (بعض الأمراض زي Leukemia ممكن تضعف الـ Antigens، أو أمراض المناعة ممكن تسبب Autoantibodies).
- تاريخ نقل الدم (Transfusion History): (نقل فصيلة مختلفة ممكن يسبب Mixed Field).
- الجنس (Sex): (ذكر/أنثى).
- الحمل (Pregnancy History): (لو أنثى، هل حامل أو كان فيه حمل قريب؟ ممكن يأثر على الأجسام المضادة).
- العلاجات (Medications): (بعض الأدوية ممكن تأثر على جهاز المناعة أو كرات الدم).
- الخطوة الثانية: تحليل نوع الـ Discrepancy بناءً على المخطط
- زي ما قلنا، الـ Discrepancy ممكن تكون:
- في الـ Forward Grouping:
- Weak or Missing Reaction (تفاعل ضعيف أو مفقود).
- Extra Reaction (تفاعل إضافي).
- Mixed Field Reaction (تفاعل ميداني مختلط).
- في الـ Reverse Grouping:
- Weak or Missing Reaction (تفاعل ضعيف أو مفقود).
- Extra Reaction (تفاعل إضافي).
- في الـ Forward Grouping:
- زي ما قلنا، الـ Discrepancy ممكن تكون:
- الخطوة الثالثة: التعامل مع كل نوع Discrepancy على حدة
أولاً: مشاكل الـ Forward Grouping
- Weak or Missing Reaction in Forward:
- الأسباب المحتملة:
- Subgroups of A or B (فصائل فرعية ضعيفة).
- Weakened Antigens بسبب مرض (زي حالات Leukemia).
- Transplant (زرع نخاع من فصيلة مختلفة).
- Neutralization of reagent by soluble antigens (في حالات نادرة لبعض الأورام مثلاً).
- الإجراءات المقترحة:
- نعيد الاختبار باستخدام Anti-A و Anti-B Reagents من شركة تانية أو lot number مختلف.
- استخدام Anti-A,B Reagent (مش روتيني، بيساعد في اكتشاف الـ Subgroups الضعيفة).
- لو لسه المشكلة موجودة، ممكن نعمل تقنيات متقدمة زي Adsorption و Elution باستخدام Anti-A أو Anti-B.
- لو السبب Neutralization، نعمل Washing كويس للـ Cells (غسيل كرات الدم الحمراء لإزالة المواد الذائبة) ونعيد الاختبار.
- في حالات الزرع، نراجع التاريخ الطبي ونحدد الفصيلة المناسبة للنقل.
- الأسباب المحتملة:
- Extra Reaction in Forward:
- الأسباب المحتملة:
- Rouleaux: (تجمعات غير حقيقية تشبه التجلط).
- الحل: نعمل Washing للـ Cells بالـ Saline ونعيد الاختبار.
- Wharton's Jelly Contamination: (مادة جيلاتينية من الحبل السري في عينات حديثي الولادة).
- الحل: نعمل Washing كتير جداً للـ Cells ونعيد. لو متحلتش، نطلب عينة تانية من الطفل نفسه (مش من الحبل السري).
- Acquired B Antigen: (تغير مؤقت في Antigen A ليشبه B بسبب عدوى بكتيرية في الجهاز الهضمي غالباً).
- الحل: نعيد الاختبار بـ Reagents مختلفة، نعمل Typing للـ Cells باستخدام Anti-A1 Lectin للتأكد إنها A1، نعمل Auto Control (تفاعل السيرم مع الخلايا بتاعته)، ونراجع History الحالة (هل فيه عدوى؟).
- Cold Autoantibody: (جسم مضاد ذاتي يتفاعل في البرد).
- الحل: نستخدم تقنية Pre-warm (تدفئة العينة والريأجينتات لـ 37 درجة)، نستخدم عينة EDTA ونحافظ عليها دافية. في حالات صعبة، ممكن نستخدم مواد زي DTT (Dithiothreitol) أو 2-ME (2-Mercaptoethanol) لتكسير الأجسام المضادة دي (شغل متقدم).
- A(B) or B(A) Phenotype: (فصائل نادرة بتظهر فيها كمية بسيطة من الـ Antigen التاني).
- الحل: نشتغل بـ Reagents تانية ونعيد الاختبار.
- Polyagglutination: (كرات دم حمراء بتتفاعل مع معظم أنواع السيرم بسبب كشف Antigens مخفية اسمها Cryptantigens).
- الحل: نستخدم Reagents من مصدر غير بشري (Non-human Antisera) أو أنواع معينة من السيرم (زي Cord Serum) اللي غالباً مفيهاش Antibodies ضد الـ Cryptantigens دي.
- Rouleaux: (تجمعات غير حقيقية تشبه التجلط).
- الأسباب المحتملة:
- Mixed Field Reaction in Forward: (Mixed Cell Population)
- الأسباب المحتملة:
- نقل دم حديث بفصيلة مختلفة (مثلاً شخص A واخد دم O، هنشوف خلايا A وخلايا O).
- زرع نخاع (Bone Marrow Transplant) من فصيلة مختلفة.
- بعض الـ Subgroups (زي A3 بتدي شكل Mixed Field مع Anti-A).
- الحل: نراجع تاريخ الحالة (Transfusion/Transplant History) ونعرف سبب وجود نوعين من الخلايا.
- الأسباب المحتملة:
- Weak or Missing Reaction in Forward:
ثانياً: مشاكل الـ Reverse Grouping
- Weak or Missing Reaction in Reverse:
- الأسباب المحتملة:
- Prozone Effect: (زيادة تركيز الأجسام المضادة بيمنع التفاعل، نادر في الفصايل).
- الحل: ممكن نخفف السيرم (Serum Dilution) ونعيد الاختبار (بيتعمل فقط في الحالة دي).
- ضعف إنتاج الأجسام المضادة:
- السن: حديثي الولادة (لسه مكونوش Antibodies) أو كبار السن (ممكن تضعف عندهم).
- الحالة المناعية: أمراض نقص المناعة أو أدوية مثبطة للمناعة.
- الحل: نراجع السن و الـ History و التشخيص. نعمل Incubation (تحضين) لأنابيب الـ Reverse في درجة حرارة الغرفة (Room Temperature) لمدة أطول (مثلاً 15-30 دقيقة). لو مفيش نتيجة، ممكن نحضن في درجة حرارة 18°م أو 4°م (لمدة أطول).
- Steric Hindrance: (ارتباط بروتينات Complement بالجسم المضاد بعد ما يرتبط بالـ Antigen على كرات الدم الحمراء، وده بيمنع الارتباط بين الكرات).
- الحل: يفضل استخدام عينة EDTA (مانع تجلط مختلف لا يسمح بتنشيط الـ Complement بنفس الطريقة) لتجنب المشكلة دي.
- Prozone Effect: (زيادة تركيز الأجسام المضادة بيمنع التفاعل، نادر في الفصايل).
- الأسباب المحتملة:
- Extra Reaction in Reverse:
- الأسباب المحتملة:
- Subgroup with Anti-A1: (شخص فصيلته A2 أو A2B وعنده Anti-A1 بيتفاعل مع خلايا A1 cells المستخدمة في الـ Reverse).
- الحل: نعمل اختبار لخلايا المريض بـ Anti-A1 Lectin للتأكد من إنها A2. ممكن نختبر الـ Plasma بتاعته مع خلايا معروفة إنها A2 cells (المفروض ميديش تفاعل).
- Cold Alloantibody: (جسم مضاد عند المريض ضد Antigen موجود على خلايا الـ Reagent RBCs المستخدمة في الـ Reverse، وبيتفاعل في البرد).
- الحل: نعمل Antibody Identification عشان نعرف إيه هو الجسم المضاد ده. ممكن نعيد الـ Reverse باستخدام RBCs تانية لا تحتوي على الـ Antigen ده.
- Cold Autoantibody: (جسم مضاد ذاتي بيتفاعل مع خلايا المريض وكمان خلايا الـ Reagent RBCs في البرد).
- الحل: نعمل DAT (Direct Antiglobulin Test) عشان نشوف هل فيه أجسام مضادة على خلايا المريض نفسه. نستخدم تقنية Pre-warm. في حالات صعبة ممكن نعمل Adsorption أو Cold Adsorption (سحب الجسم المضاد من السيرم باستخدام خلايا المريض أو خلايا تانية في البرد).
- Passively Acquired Antibody: (أجسام مضادة جاية من بره، مثلاً من نقل بلازما أو منتجات دم تانية).
- الحل: نراجع History النقل والعلاجات.
- Rouleaux: (زي ما قلنا، ممكن يسبب تجمعات كاذبة في الـ Reverse كمان).
- الحل: نستخدم تقنية Saline Replacement Technique (استبدال السيرم بمحلول ملح بعد الطرد المركزي، لو التجمع راح يبقى Rouleaux، لو فضل يبقى تجلط حقيقي).
- Subgroup with Anti-A1: (شخص فصيلته A2 أو A2B وعنده Anti-A1 بيتفاعل مع خلايا A1 cells المستخدمة في الـ Reverse).
- الأسباب المحتملة:
- Weak or Missing Reaction in Reverse:
خاتمة وتوصيات
- التأكيد: ضرورة قراءة وفهم الـ Flow Charts دي أكتر من مرة.
- الربط: ربط الـ Flow Charts بالمخطط العام لتقسيم الـ Discrepancies:
- Forward (Weak/Missing, Extra, Mixed Field)
- Reverse (Weak/Missing, Extra)
- معرفة أشهر أسباب كل نوع.
- الهدف من المحاضرة: تقديم نظرة عامة ومبسطة لأشهر المشاكل اللي بتقابلنا في تحديد الفصيلة (ABO Discrepancies) وتكون أساس نبني عليه.
- أمنية: يكون الشرح وصل بشكل ميسر ووضح الأمور اللي ممكن تكون غامضة.
- ختام: شكر وسلام.
الخلاصة: تحديد فصيلة الدم عملية دقيقة، وعند حدوث عدم تطابق (Discrepancy) بين نتيجة الـ Forward و Reverse grouping، يجب اتباع منهج منظم يبدأ بالتحقق من الأخطاء الفنية والبيانات، ثم جمع تاريخ الحالة، وأخيراً تحليل نوع عدم التطابق وتطبيق الإجراءات التصحيحية المناسبة لكل سبب محتمل سواء كان في الـ Forward أو الـ Reverse.
تفريغ المقطع في صورة سؤال و جواب
مقدمة ومراجعة عامة للـ ABO Discrepancies
سؤال: المحاضرة دي بتكمل كلام عن إيه بالظبط؟
إجابة: المحاضرة دي بتستكمل شرح موضوع الـ Introduction to ABO Discrepancies، اللي هي المشاكل أو عدم التطابق اللي بيظهر في تحديد فصايل الدم بنظام ABO.
سؤال: إيه أنواع المشاكل الرئيسية اللي ممكن تظهر في تحديد الفصيلة حسب كلام المحاضر؟
إجابة: المشاكل ممكن تظهر في الـ Forward grouping (تحديد الـ Antigens على كرات الدم الحمرا) لوحدها، أو في الـ Reverse grouping (تحديد الـ Antibodies في الـ Plasma/Serum) لوحدها، أو ممكن تظهر في الاتنين مع بعض.
سؤال: إيه أشكال المشاكل اللي ممكن تحصل في الـ Forward والـ Reverse مع بعض في نفس الوقت؟
إجابة: ممكن تكون المشكلة عبارة عن Weak أو Missing Reaction (تفاعل ضعيف أو مفقود) في الـ Forward والـ Reverse سوا، أو ممكن تكون Extra Reaction (تفاعل زيادة غير متوقع) في الـ Forward والـ Reverse سوا.
سؤال: إيه أمثلة الحالات اللي ممكن تسبب Extra Reaction في الـ Forward والـ Reverse مع بعض؟
إجابة: المحاضر ذكر أمثلة زي حالات الـ Rouleaux (تلاصق كرات الدم الحمرا بشكل يشبه أعمدة النقود المعدنية) وحالات الـ Cold Autoantibody (وجود أجسام مضادة ذاتية بتتفاعل في درجات الحرارة الباردة).
سؤال: إيه الحاجة اللي المحاضر أكد على أهمية وجودها في ذهننا دايمًا واحنا شغالين في تحديد الفصايل؟
إجابة: المخطط أو الـ Flow Chart الخاص بالـ ABO Discrepancies لازم يكون في بالنا دايمًا، ومع كتر الشغل والتكرار هيثبت في دماغنا.
خطوات التعامل الأولية مع المشاكل (Troubleshooting)
سؤال: لو ظهرت مشكلة في تحديد الفصيلة، إيه أول خطوة عملية لازم نعملها قبل أي حاجة تانية؟
إجابة: أول حاجة لازم نتأكد منها هي العينة نفسها: هل عليها Label (ملصق بيانات)؟ وهل البيانات اللي على الـ Label كاملة وصحيحة؟ لو لأ، يبقى العينة دي لازم نستبعدها (reject) ونطلب عينة جديدة ونعيد الاختبار.
سؤال: لو بيانات العينة تمام، إيه الأسباب التانية اللي ممكن تكون سبب المشكلة ولازم نتأكد منها في الأول؟
إجابة: لازم نتأكد من عدم وجود أخطاء فنية أو إجرائية (Clinical Errors). زمان كان ممكن وجود كسر إزاز صغير (Glass Fragments) في الأنابيب يسبب مشاكل. كمان لازم نتأكد إن العينة محصلهاش Hemolysis (تكسر كرات الدم الحمرا) لأي سبب خارجي، وإن المريض معندوش مشاكل Clotting بتسبب ظهور Fibrin (جلطات صغيرة) في الأنبوبة، وإن الـ Reagents (الكواشف) مش ملوثة (Contaminated)، وإن الأجهزة مظبوطة ومعمولة لها Calibration، وإن طريقة الشغل (Procedure) ماشية بالخطوات المظبوطة الموصى بها.
سؤال: لو لقينا أي مشكلة من المشاكل الفنية دي زي عينة مش متعلمة أو فيها Hemolysis أو Reagent بايظ، إيه الحل؟
إجابة: الحل هو تصحيح المشكلة دي وإعادة الاختبار. يعني لو مفيش Label نطلب عينة جديدة، لو فيه Hemolysis نسحب عينة جديدة، لو فيه Fibrin نحاول نتعامل معاه أو نسحب عينة Plasma، لو الـ Reagent بايظ نستخدم واحد سليم، لو الأجهزة مش مظبوطة نظبطها، لو الطريقة غلط نتبع الطريقة الصح. لو المشكلة اتحلت، نكمل شغلنا عادي.
أهمية تاريخ الحالة (Patient History) وتصنيف المشاكل
سؤال: لو المشكلة لسه موجودة بعد مراجعة كل الأسباب الفنية والإجرائية، إيه الخطوة المهمة اللي جاية؟
إجابة: الخطوة اللي بعد كده هي إننا نجيب الـ History (التاريخ المرضي والطبي) بتاع الحالة.
سؤال: إيه المعلومات الأساسية اللي بندور عليها في الـ History بتاع المريض؟
إجابة: بندور على السن (Age)، التشخيص (Diagnosis)، تاريخ نقل الدم (Transfusion History)، النوع (ذكر/Male أو أنثى/Female)، ولو أنثى بنسأل عن الحمل (Pregnancy) وتاريخه، والأدوية أو العلاجات (Medications) اللي المريض بياخدها.
سؤال: المحاضر قسم أنواع الـ Discrepancies اللي ممكن تكون بسبب المريض نفسه إزاي؟
إجابة: قسمها لأربع مجموعات رئيسية:
- Weak أو Missing Reaction في الـ Forward.
- Extra Reaction في الـ Forward (وممكن تكون معاها Mixed Field).
- Weak أو Missing Reaction في الـ Reverse.
- Extra Reaction في الـ Reverse.
مشاكل الـ Forward Grouping: تفاعل ضعيف أو مفقود (Weak/Missing)
سؤال: إيه الأسباب المحتملة لظهور تفاعل ضعيف أو مفقود (Weak or Missing Reaction) في الـ Forward grouping؟
إجابة: ممكن يكون السبب وجود فصايل فرعية (Subgroups) زي A2 أو A3 اللي الـ Antigen بتاعها أضعف، أو ضعف مكتسب في التعبير عن الـ Antigen (Weak Expression) بسبب أمراض زي الـ Leukemia، أو بسبب زرع نخاع (Bone Marrow Transplant) من فصيلة مختلفة، أو بسبب حدوث Neutralization للـ Reagent نتيجة وجود كميات كبيرة من Antigens دايبة في الـ Plasma (Soluble Antigens).
سؤال: لو المشكلة بسبب Subgroup أو Weak Expression مكتسب، إيه الإجراءات اللي ممكن نعملها؟
إجابة: ممكن نعيد الاختبار باستخدام Reagents تانية من شركة مختلفة أو lot مختلف. ممكن نستخدم Reagent اسمه Anti-A,B. في بعض الحالات المتقدمة، ممكن نعمل Adsorption و Elution للـ Antibody من على كرات الدم.
سؤال: إيه الحل لو كان سبب ضعف التفاعل هو Neutralization للـ Reagent بسبب Soluble Antigens؟
إجابة: الحل هنا هو إننا نغسل كرات الدم الحمرا (RBCs) كويس أوي (نعمل Washing) كذا مرة عشان نشيل أي Soluble Antigens ممكن تكون لازقة عليها أو موجودة في الـ Plasma اللي حواليها، وبعدين نعيد الاختبار تاني.
مشاكل الـ Forward Grouping: تفاعل زيادة (Extra Reaction)
سؤال: إيه أشهر الأسباب اللي بتعمل تفاعل زيادة غير متوقع (Extra Reaction) في الـ Forward grouping؟
إجابة: الأسباب المشهورة تشمل: Rouleaux، تلوث عينة الحبل السري بالـ Wharton's Jelly، حدوث Acquired B antigen (اكتساب Antigen شبه B لناس فصيلتهم A)، وجود Cold Autoantibody، حالات الـ A(B) phenotype أو B(A) phenotype، وظاهرة الـ Polyagglutination (لما Antigens مخفية اسمها Cryptantigens تتكشف على سطح الخلية).
سؤال: إزاي بنتعامل مع مشكلة الـ Rouleaux والـ Wharton's Jelly في الـ Forward؟
إجابة: في حالة الـ Rouleaux، بنعمل Washing للخلايا كذا مرة بالمحلول الملحي (Saline) ونعيد الاختبار. في حالة الـ Wharton's Jelly، بنعمل Washing كتير جداً للخلايا ونعيد، ولو المشكلة متحلتش، بنطلب عينة تانية من الطفل نفسه (مش من الحبل السري).
سؤال: لو شاكين في Acquired B، إيه الخطوات المقترحة للتحقق والتعامل؟
إجابة: ممكن نعيد الاختبار باستخدام Anti-B Reagent تاني مختلف، نعمل Typing لخلايا المريض باستخدام Anti-A1 Lectin عشان نتأكد إنه A1، نعمل Auto Control (تفاعل خلايا المريض مع الـ Serum بتاعه)، ونراجع الـ History بتاع المريض (خصوصًا لو فيه عدوى بكتيرية في الجهاز الهضمي).
سؤال: إزاي بنتعامل مع الـ Cold Autoantibody اللي بيسبب Extra Reaction في الـ Forward؟
إجابة: بنستخدم تقنية الـ Pre-warm (تسخين العينة والـ Reagents لـ 37 درجة مئوية قبل الاختبار)، ويفضل استخدام عينة مسحوبة على EDTA ونحافظ عليها دافية. في الحالات الصعبة، ممكن نستخدم مواد زي DTT (Dithiothreitol) أو 2-ME (2-Mercaptoethanol) عشان تكسر الـ Antibodies دي (خصوصًا لو IgM).
سؤال: في حالة الـ Polyagglutination، إيه نوع الـ Reagents اللي ممكن نستخدمها وليه؟
إجابة: بنستخدم Reagents مصدرها مش بشري (Non-human Antisera) أو أنواع معينة من الـ Serum البشري (زي Cord Serum). السبب إن الـ Reagents دي غالبًا مفيهاش الـ Antibodies اللي بتتفاعل مع الـ Cryptantigens اللي اتكشفت على سطح الخلايا.
مشاكل الـ Forward Grouping: المجال المختلط (Mixed Field)
سؤال: إيه المقصود بتفاعل الـ Mixed Field في الـ Forward grouping؟
إجابة: الـ Mixed Field معناه إننا بنشوف مجموعتين من كرات الدم الحمرا في نفس الأنبوبة أو نفس التفاعل: مجموعة متجمعة (agglutinated) ومجموعة حرة مش متجمعة. بيسموها ساعات Mixed Cell Population.
سؤال: إيه الأسباب الرئيسية اللي ممكن تؤدي لظهور تفاعل Mixed Field؟
إجابة: الأسباب الأساسية هي: نقل دم حديث (Recent Transfusion) من فصيلة مختلفة (زي مريض A واخد دم O)، زرع نخاع (Bone Marrow Transplant) من متبرع فصيلته مختلفة، أو وجود بعض الـ Subgroups زي A3.
مشاكل الـ Reverse Grouping: تفاعل ضعيف أو مفقود (Weak/Missing)
سؤال: إيه الأسباب المحتملة لظهور تفاعل ضعيف أو مفقود (Weak or Missing Reaction) في الـ Reverse grouping؟
إجابة: الأسباب ممكن تكون: ظاهرة الـ Prozone (لما يكون تركيز الـ Antibody عالي جداً وده بيمنع التفاعل بشكل صحيح)، السن (الأطفال الصغيرين أوي تحت 4-6 شهور مبيكونوش كونوا Antibodies، وكبار السن جداً ممكن مستوى الـ Antibodies يقل عندهم)، الحالة المناعية للمريض (زي حالات نقص المناعة أو اللي بياخدوا أدوية مثبطة للمناعة)، أو ظاهرة الـ Steric Hindrance بسبب ارتباط بروتينات الـ Complement بالـ Antibodies بعد ارتباطها بالـ Antigens على خلايا الـ Reverse.
سؤال: لو سبب ضعف التفاعل في الـ Reverse هو السن أو الحالة المناعية، إيه الإجراءات اللي ممكن نعملها عشان نحاول نقوي التفاعل؟
إجابة: ممكن نعمل Incubation لأنابيب الـ Reverse في درجة حرارة الغرفة (Room Temperature) لمدة أطول (15-30 دقيقة)، ولو مفيش نتيجة ممكن نعمل Incubation عند درجة حرارة أقل (18 درجة مئوية أو حتى 4 درجات مئوية) عشان نشجع الـ Antibodies الباردة إنها تتفاعل.
سؤال: إيه نوع العينة المفضل استخدامه عشان نتجنب مشكلة الـ Steric Hindrance اللي ممكن يسببها الـ Complement في الـ Reverse grouping؟
إجابة: يفضل استخدام عينة مسحوبة على EDTA لأن الـ EDTA بيمنع تفعيل نظام الـ Complement وبالتالي بيقلل احتمالية حدوث المشكلة دي.
مشاكل الـ Reverse Grouping: تفاعل زيادة (Extra Reaction)
سؤال: إيه الأسباب الشائعة لظهور تفاعل زيادة (Extra Reaction) في الـ Reverse grouping؟
إجابة: الأسباب دي تشمل: وجود Anti-A1 عند شخص فصيلته Subgroup من A (زي A2 أو A2B)، وجود Cold Alloantibody (جسم مضاد بارد غير ذاتي بيتفاعل مع Antigen معين على خلايا الـ Reagent المستخدمة في الـ Reverse)، وجود Cold Autoantibody (جسم مضاد بارد ذاتي بيتفاعل مع خلايا المريض نفسه وكمان مع خلايا الـ Reverse)، وجود Passively Acquired Antibody (زي مريض واخد Plasma أو منتجات دم فيها Antibodies)، أو ظاهرة الـ Rouleaux.
سؤال: لو شاكين إن سبب الـ Extra Reaction في الـ Reverse هو Anti-A1 في شخص فصيلته Subgroup، إزاي نتأكد؟
إجابة: ممكن نعمل Typing لخلايا المريض باستخدام Anti-A1 Lectin عشان نثبت إنه مش A1. وممكن نختبر الـ Plasma بتاع المريض مع خلايا معروفة إنها A2 Cells (المفروض ميتفاعلش لو هو Anti-A1 فعلاً).
سؤال: لو السبب هو Cold Alloantibody، إيه الخطوات المقترحة للتعامل مع المشكلة؟
إجابة: ممكن نعمل Antibody Identification عشان نحدد بالظبط إيه هو الـ Alloantibody ده. بعد ما نعرفه، ممكن نعيد الـ Reverse grouping باستخدام خلايا Reagent Cells تكون Antigen-negative (يعني مش عليها الـ Antigen اللي الـ Antibody ده بيتفاعل معاه).
سؤال: إزاي بنتعامل مع الـ Cold Autoantibody اللي بيسبب Extra Reaction في الـ Reverse؟
إجابة: ممكن نعمل اختبار DAT (Direct Antiglobulin Test) عشان نشوف هل الـ Autoantibody ده مغطي كرات دم المريض نفسه. ممكن نستخدم تقنية الـ Pre-warm. وفي بعض الحالات، ممكن نعمل Cold Adsorption عشان نشيل الـ Autoantibody من الـ Serum قبل ما نعمل الـ Reverse grouping.
سؤال: إيه الطريقة اللي المحاضر ذكرها لحل مشكلة الـ Rouleaux لو هي اللي عاملة Extra Reaction في الـ Reverse؟
إجابة: بنستخدم تقنية اسمها Saline Replacement Technique، ودي بتعتمد على استبدال الـ Serum أو الـ Plasma اللي فيه بروتينات عالية بمحلول ملحي (Saline) بعد عمل Centrifugation أولية، وبعدين نشوف هل التجمع لسه موجود ولا لأ. لو راح يبقى كان Rouleaux.
الخلاصة والتوصيات
سؤال: إيه النصيحة النهائية اللي المحاضر أكد عليها بخصوص الـ Flow Charts والمخططات؟
إجابة: نصح بإننا نقرا ونراجع الـ Flow Charts والمخطط بتاع تقسيم الـ Discrepancies أكتر من مرة، عشان نفهم التقسيمة كويس ونعرف أشهر الأسباب لكل نوع من المشاكل والخطوات المقترحة لحلها.
سؤال: إيه الهدف العام من المحاضرة دي زي ما المحاضر لخصه في النهاية؟
إجابة: الهدف كان إنها تكون مقدمة مختصرة ومبسطة لموضوع الـ ABO Discrepancies، بحيث تكون أساس نقدر نبني عليه بعد كده، وتوضح الأمور اللي ممكن تكون غامضة أو مش مفهومة للي بيشتغل في بنك الدم.
تفريغ المقطع في صورة شرائح
📘 New to Blood Bank?
Start your 5-day journey with Immunohematology Made Easy — a simple, beginner-friendly guide with real-life examples!
👉 Get Your Copy Now